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实验室发酵罐的构成及实验步骤

作者:发酵罐 时间:2018-03-05 11:25
发酵罐是由3条线路构成的,一个是空气的进出(不进入夹层),蒸汽的进出(只在对空气过滤器灭菌时才进入罐体,是 从夹层的上进下出的),水的进出(进入夹层内,从下进上出。当开始发酵时,水路会形成一个循环,由温度感应器对其进行调节,保 信息摘要:
实验室 发酵罐 的构成及实验步骤 一、实验原理 发酵罐是由3条线路构成的,一个是空气的进出(不进入夹层),蒸汽的进出(只在对空气过滤器灭菌时才进入罐体,是 从夹层的上进下出的),水的进出(进入夹层内,从下进上出

实验室发酵罐的构成及实验步骤

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实验室发酵罐的构成及实验步骤

实验室发酵罐的构成及实验步骤

 

一、实验原理

发酵罐是由3条线路构成的,一个是空气的进出(不进入夹层),蒸汽的进出(只在对空气过滤器灭菌时才进入罐体,是 从夹层的上进下出的),水的进出(进入夹层内,从下进上出。当开始发酵时,水路会形成一个循环,由温度感应器对其进行调节,保证水的温度在发酵所需温度范围内)。

二、实验设备

我们实验室所用的发酵罐是由蒸汽发生器、空气压缩机、储气罐和发酵罐和控制面板组成的。

1.         蒸汽发生器:黄灯亮代表需要进水,进水好后红灯亮,自动开始加热。其背后有一阀门,是控制蒸汽流出的开关,常开。

2.         空气压缩机:摁下红色按钮起开始向储气罐内通入空气

3.         储气罐:由于实验器材老化,处于安全考虑,压力控制在2Kg(0.2Mpa),超过这一压力则要关闭空气压缩机。储气罐底部有一出气的安全阀,此阀是常开的。

4.         发酵罐:发酵罐上连有电极,当要打开发酵罐时要先将其拆下,避免损坏。在旋紧发酵罐时要对角线旋紧旋钮。

不锈钢锥形发酵罐

三、实验步骤

²  实验前的预备工作

1.         清洗发酵罐:将发酵罐的电极拆下,旋钮选出,对发酵罐进行清洗

2.         检查气密性

1)        将阀门F14(发酵罐的出气阀)与发酵罐夹层的出水阀打开,在实验过程中这是一直要打开的

2)        打开电源总闸,打开蒸汽发生器水龙头,将水通入蒸汽发生器内,红灯亮时关闭水龙头

3)        将空气压缩机的开关打开,向储气罐内通入空气,当压力到2Kg(0.2Mpa)时,关闭空压机。

4)        通过进样孔向发酵罐内通入一定量的去离子水,使其没过空气管口。

5)        先打开发酵罐的进气阀门F11、F13,再打开储气罐连接发酵罐的管道阀门.

6)        当罐内压力上升到0.05MPa时,关闭F14,F13,将发酵罐底部取样旋钮旋至最下放方以防漏气,此时罐内压力在30min内保持不变则气密性良好。

3.         发酵罐的灭菌

空消:

1.         30min后,打开F14,F13阀门,调节大小使其稳定在0.03MPa

2.         在打开蒸汽发生器的阀门前,先将发酵罐的蒸汽出口阀门打开

3.         打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐的进气阀门,关闭进气阀F13以防倒吸,当温度上升到121℃时,保持30min,注意调节F14,使罐内压力维持在一定的压力值(过大会有危险,过小温度难以上升)此时发酵的前期准备工作已就绪,开始准备发酵。

2、  30min后,泄压;关闭蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门,打开F13进空气的阀门(防止罐体变形)

1.          

²  发酵步骤

(一)  实消

1.         冷却发酵罐(防止过热物料喷出),从加样孔内通入物料(物料要先全部溶解)于6L左右,打开搅拌器;

2.         打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门,关闭F13以防倒吸;

3.         当罐内温度上升到90℃时,停止搅拌以防电极被烧坏;

4.         对空气过滤器灭菌;当温度上升到100℃时,打开空气过滤器的阀门F3,关闭进气阀F11,再打开进气阀F13,对空气过滤器灭菌15min。

5.         实消;15min后,关闭空气过滤器的阀门F3与进气阀F13,打开F11,当温度上升到121℃时,保持30min,进行实消的灭菌。

6.         30min后,泄压,打开F13进气阀,再对罐体进行降温;关闭所有的蒸汽进口阀,打开水龙头,打开冷凝水的进出口阀(先出后进)。

(二)  接种

1.         对罐体进行降温,冷却到30℃左右;

2.         接种;在进样孔旁围上一圈脱脂棉,倒上酒精,点火对加样孔进行灭菌,灭菌后,由进样孔进行接种。

(三)  开始发酵

1.         设置参数,温度设置在37℃,打开循环水路的阀门,水龙头关小,开始发酵;

2.         取样;没两小时取样一次,取样前要相对管道进行灭菌,打开取样器的阀门,打开蒸汽进口阀,对管道灭菌15min,在冷却5min后方可取样,每次取样前都要对管道进行灭菌。将出样旋钮旋上,打开取样器的阀门,用离心管或试管接样,冷却后放入冰箱,每12h镜检一次,48h后统一检测OD值。

(四)  发酵结束

1.         发酵结束后,将样品全部放出;

2.         关闭进水阀,对夹套进行排水,最后关闭除出水阀外的所有阀门;

3.         将发酵罐电极拆下,清洗发酵罐。

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文章标题:实验室发酵罐的构成及实验步骤

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